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MilliporeSigma

P6911

Protéase from Streptomyces griseus

BioReagent, DNase, RNase, and nickase, none detected (No RNase.)

Synonyme(s) :

Actinase E, Pronase E

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A propos de cet article

Numéro CAS:
UNSPSC Code:
12352204
eCl@ss:
32160410
EC Number:
232-909-5
NACRES:
NA.21
MDL number:
Concentration:
≥4 unit/mg
Service technique
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grade

Molecular Biology

Quality Level

product line

BioReagent

form

powder

mol wt

monomer ~20 kDa

concentration

≥4 unit/mg

solubility

water: 5-20 mg/mL

foreign activity

DNase, RNase, and nickase, none detected (No RNase.)

storage temp.

−20°C

General description

Complètement inactivée par chauffage à une température supérieure à 80 °C pendant 15 à 20 minutes.
A mixture of at least three proteolytic activities including an extracellular serine protease. In general, serine proteases display a wide range of substrate specificities, which are believed to be mediated by an active site composed of one Asp, one His, and a Ser residue in the molecule. This enzyme prefers to hydrolyze peptide bonds on the carboxyl side of glutamic or aspartic acid.

Application

Cette enzyme est plus active dans une plage de pH plus élevée que les protéases alcalines connues, présentant une activité protéolytique même dans une solution de NaOH à 0,2 N. Elle s′avère utile pour la protéolyse des protéines insolubles et pour les études structurelles sur les protéines.
La protéase est généralement utilisée pour les procédures d′isolement des acides nucléiques, en réalisant des incubations de 0,5 à 3,0 heures en présence de dodécylsulfate de sodium à 0,2 % et d′EDTA à 10 mM.
Suitable for:
  • Nucleic acid isolation procedures in incubations
  • Degrade protein during nucleic acid purification
  • Proteolysis of insoluble protein
  • Structural protein studies

Biochem/physiol Actions

Mélange d′au moins trois activités protéolytiques incluant une sérine protéase extracellulaire. En général, les sérines protéases sont actives sur une large gamme de substrats, et cette activité est attribuée à un site actif composé d′un résidu Asp, un résidu His et un résidu Ser dans la molécule. Cette enzyme hydrolyse préférentiellement les liaisons peptidiques du côté carboxylique de l′acide glutamique ou aspartique.

Preparation Note

Isolée à partir de milieu de culture de S. griseus.

Analysis Note

The protease is incubated for 10 minutes at pH 7.5 at 37°C in a 6 ml reaction volume containing 0.54% casein and 0.041 M potassium phosphate buffer. The reaction is stopped by the addition of 5.0 ml of 0.11 M trichloroacetic acid.

Other Notes

One unit will hydrolyze casein to produce color equivalent to 1.0 μmole (181 μg) of tyrosine per min at pH 7.5 at 37 °C (color by Folin-Ciocalteu reagent).
This protease is completely inactivated by heating above 80°C for 15-20 minutes. This enzyme is more active at a higher pH range, showing the proteolytic activity even in 0.2N NaOH solution.


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Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3

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Respiratory system

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11 - Combustible Solids

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Not applicable

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Eyeshields, Gloves, type N95 (US)



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D Y Yum et al.
Bioscience, biotechnology, and biochemistry, 58(3), 470-474 (1994-03-01)
SAP, an extracellular alkaline serine protease produced by Streptomyces sp. YSA-130, was purified to homogeneity by CM-Sephadex column chromatography and crystallization. The enzyme was a monomeric protein with a molecular weight of 19,000 as estimated by SDS-PAGE and gel filtration.
N Yoshida et al.
Journal of biochemistry, 104(3), 451-456 (1988-09-01)
A protease was purified 163-fold from Pronase, a commercial product from culture filtrate of Streptomyces griseus, by a series of column chromatographies on CM-Toyopearl (Fractogel), Sephadex G-50, hydroxyapatite, and Z-Gly-D-Phe-AH-Sepharose 4B using Boc-Ala-Ala-Pro-Glu-pNA as a substrate. The final preparation was
Hyun-Ju Cho et al.
Disease models & mechanisms, 12(5) (2019-05-03)
DYRK1A is a major causative gene in Down syndrome (DS). Reduced incidence of solid tumors such as neuroblastoma in DS patients and increased vascular anomalies in DS fetuses suggest a potential role of DYRK1A in angiogenic processes, but in vivo