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MilliporeSigma

P4850

Protéinase K from Tritirachium album

buffered aqueous glycerol solution, Molecular Biology, ≥800 units/mL

Synonyme(s) :

Endopeptidase K

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A propos de cet article

Numéro CAS:
UNSPSC Code:
12352204
NACRES:
NA.54
Numéro CE :
MDL number:
eCl@ss:
32160410
Concentration:
≥10 mg/mL, ≥800 units/mL
Service technique
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grade

Molecular Biology

Quality Level

form

buffered aqueous glycerol solution

mol wt

28.93 kDa

concentration

≥10 mg/mL, ≥800 units/mL

impurities

≤0.5 ppm DNA (PicoGreen® assay)

foreign activity

DNase, Nickase and RNase, none detected

storage temp.

2-8°C

Application

Proteinase K from Tritirachium album has been used:
  • in bovine endometrial epithelial cells for herpes viral DNA extraction
  • for viral RNA extraction from nasal swabs
  • as a component of phase lock and direct PCR lysis buffer

The product has been used to study its pre-treatment effects on the silk fibroin. The aspects analysed in this study included the crystallographic properties of hydroxyapatite (HAp), and the microstructure and microhardness of the composites. The enzyme has also been used to facilitate the access of probes to rRNA using FISH techniques to detect pathogenic Staphylococcus aureus.
Utile pour l′inactivation protéolytique des nucléases lors de l′isolement de l′ADN et de l′ARN.
Utile pour l′inactivation protéolytique des nucléases lors de l′isolement de l′ADN et de l′ARN.
Élimine les endotoxines qui se lient aux protéines cationiques telles que le lysozyme et la ribonucléase A.
S′est avéré utile pour l′isolement des mitochondries hépatiques, de levure et de haricot mungo.
Détermination de la localisation des enzymes sur les membranes.
Traitement des coupes de tissus incluses en paraffine pour exposer les sites de liaison à l′antigène pour le marquage par anticorps.
Digestion des protéines des échantillons de tissu cérébral pour la recherche sur les prions responsables des encéphalopathies spongiformes transmissibles (EST).

Biochem/physiol Actions

Proteinase K has a broad specificity and degrades many proteins even in the native state. It mainly cleaves the peptide bond adjacent to the carboxyl group of aliphatic and aromatic amino acids with blocked α-amino groups. The molecular weight of proteinase K from amino acid sequence is found to be 28,930 Da and from SDS-PAGE, it is found to be 28,500 Da. The optimum pH is between 7.5-9.0 and its isoelectric point is 8.9. Ca2+ (1-5 mM) is required for its activation. Proteinase K is inhibited by DIFP (diisopropylfluorophosphate) or PMSF (phenylmethylsulfonyl fluoride).
La protéinase K est une sérine protéase très stable et hautement réactive. Des études de cristallographie et de structure moléculaires ont indiqué que cette enzyme appartient à la famille des subtilisines, présentant une triade catalytique au site actif (Asp39-His69-Ser224). Elle est stable dans un vaste éventail d′environnements : pH, sels de tampon, détergents (SDS) et température. En présence de 0,1 à 0,5 % de SDS, la protéinase K reste active et peut digérer diverses protéines et nucléases dans les préparations d′ADN, sans compromettre l′intégrité de l′ADN isolé.

Physical form

Solution in 40% glycerol (v/v) containing 10 mM Tris-HCl, pH 7.5, with 1 mM calcium acetate.

Other Notes

One unit will hydrolyze urea-denatured hemoglobin to produce color equivalent to 1.0 μmole of tyrosine per min at pH 7.5 at 37 °C (color by Folin-Ciocalteu reagent).

Legal Information

PicoGreen is a registered trademark of Life Technologies


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Danger

hcodes

Hazard Classifications

Resp. Sens. 1

Classe de stockage

10 - Combustible liquids

flash_point_f

Not applicable

flash_point_c

Not applicable

ppe

Eyeshields, Faceshields, Gloves, type ABEK (EN14387) respirator filter



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Protocoles

Proteinase K activity measured via spectrophotometry using hemoglobin substrate, crucial for enzyme characterization.

Articles

Balancing Proteinase K cost with quality and technical support ensures optimal enzyme selection for diverse applications.

Guidelines on use of proteinase K, an enzyme commonly used to degrade proteins, and protect DNA and RNA from degradation in samples.

In blood DNA extraction, Proteinase K, an enzyme commonly used to degrade proteins, can help break down the cellular and nuclear membranes, releasing DNA from the cells that protect it from degradation and increase purity/yield making it more suitable for various molecular biology techniques.

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Numéro d'article de commerce international

RéférenceGTIN
P4850-.025ML04061824821079
P4850-.110ML04061824821093
P4850-1ML04061824821147
P4850-300UL04061824821161
P4850-5ML04061824821192
P4850-100UL04061824821116
P4850-10UL04061824821123
P4850-50UL04061824821178