Lyticase from Arthrobacter luteus

La lyticase issue d'Arthrobacter luteus a servi à lyser la paroi cellulaire de champignons afin d'en isoler l'ADN.

La lyticase issue d'Arthrobacter luteus a été utilisée :

• pour retirer la paroi de cellules et les transformer en sphéroplastes.
• comme constituant d'une solution de digestion pour incuber des cellules de levure et digérer leurs parois.
• dans l'hydrolyse enzymatique d'un précipité de mycélium pour préparer des protoplastes.

Les cellules de levure sont difficiles à altérer car leur paroi peut former des spores résistantes ou des capsules. L'ADN peut être extrait des levures à l'aide d'enzymes de lyse comme la lyticase pour induire la formation de sphéroplastes partiels. Ces sphéroplastes sont ensuite lysés pour libérer l'ADN. La lyticase est la solution privilégiée pour digérer la paroi cellulaire des levures et générer des sphéroplastes à partir des champignons en vue de leur transformation. Elle présente des activités β-(1→3)-glucane laminaripentaohydrolase, β-(1→3)-glucanase, protéase et mannanase. La lyticase est employée avec les cellules de levures appartenant notamment aux genres Candida, Debaryomyces, Saccharomyces, Saccharomycopsis, Saccharomycodes, Eremothecium et Schwanniomyces.

La lyticase est une enzyme fréquemment utilisée dans la recherche sur les champignons, en particulier pour identifier les espèces par des techniques basées sur l'amplification en chaîne par polymérase (PCR). Elle a la capacité de casser les liaisons β (1→3) et β (1→4) entre les motifs de glucose. Le lysozyme sert d'indicateur de la réponse de l'hôte médiée par les macrophages, est corrélé à la mort des globules blancs et présente un fort taux de rotation. Des taux élevés de lysozyme sérique ont été observés dans différentes pathologies inflammatoires chroniques, dans la maladie inflammatoire chronique de l'intestin, ainsi que dans des troubles hématologiques et rénaux. Le lysozyme de type c issu de blanc d'œuf de poule est couramment employé comme modèle pour étudier la structure et la fonction des protéines. La muramidase présente essentiellement une activité bactéricide contre les bactéries à Gram positif. La méthode décrite dans le bulletin pour déterminer les masses moléculaires par chromatographie par filtration sur gel est une version modifiée des techniques existantes figurant dans la littérature. Les étalons protéiques inclus dans ce kit peuvent être compatibles avec d'autres systèmes chromatographiques comme la chromatographie liquide haute performance (HPLC). Cependant, certains systèmes tampons sont susceptibles d'affecter les volumes d'élution de l'albumine et de l'anhydrase carbonique. Les protéines de ce kit ont une masse moléculaire de 29 kDa 699 kDa.

La lyticase hydrolyse le poly-β(1→3)-glucose, notamment le glucane de la paroi cellulaire des levures.

Poudre lyophilisée partiellement purifiée contenant des sels de tampon phosphate et des stabilisants

Pour en savoir plus sur les enzymes utilisées dans l′analyse des glucides complexes, rendez-vous sur www.sigma-aldrich.com/enzymeexplorer.

Produit réservé aux activités de recherche et développement. Non destiné à l'usage dans des médicaments, produits de ménage ou à d'autres fins. Se reporter à la fiche de données de sécurité pour des informations concernant les risques et pratiques de manipulation sans danger.

Une unité produit une ΔA₈₀₀ de 0,001 par minute à pH 7,5 et 25 °C, en utilisant comme substrat une suspension de levure dans un mélange réactionnel de 3 ml.