Hyaluronidase from bovine testes

L'hyaluronidase est une enzyme dérivée des testicules de taureau. Elle permet d'éliminer la masse du cumulus lors de l'isolement d'embryons de souris ou sur des ovocytes venant d'être libérés lors de leur préparation pour une culture in vitro.

On utilise des gonadotrophines pour induire une superovulation chez 20 souris femelles. On accouple ensuite les souris, puis on prélève et on compte les embryons de stade préimplantatoire. On traite les embryons à l'hyaluronidase jusqu'à ce que la masse du cumulus s'en dissocie. On met les embryons en culture, puis on les observe quotidiennement en consignant leur développement.

Ces enzymes coupent de façon aléatoire les liaisons glycosidiques β-N-acétylhexosamine-[1→4] dans l′acide hyaluronique, la chondroïtine et les sulfates de chondroïtine.

L′hyaluronidase dégrade l′hyaluronane et elle semble être régulée de façon anormale lors de la progression du cancer.

Reconstituer 1 flacon d'hyaluronidase dans 3 ml de milieu M2 (réf. M 7167 ou M 5910) ou d'eau désionisée de façon à obtenir une solution mère à 10 mg/ml. Diluer la solution mère dans du milieu M2 de façon à obtenir une concentration de travail finale d'environ 300 μg/ml.

Une unité dégrade 0,75 μg du polysaccharide acide hyaluronique par minute à pH 5,35 et 37 ºC (valeur mesurée par absorbance turbidimétrique [λ : 600 nm] sous forme complexée avec de la BSA après 45 minutes).