Agarose

Agarose contains β-D-galactose and 3,6-anhydro-α-L-galactose, linked by glycosidic bonds β(1-4).

Agarose is the most popular medium for immunoelectrophoresis because of the large pore size for rapid diffusion and for low background staining by Coomassie Blue G stain. The low EEO and high gel strength is specifically selected and tested for immunoelectrophoresis and immunodiffusion.

Gel Preparation:
1. Prepare a 1% agarose solution (sufficient for 10 gels 85 mm x 100 mm, 1-1.5 mm thick) by mixing 1.5 g agarose (Catalog No. A4679) in 150 mL of prepared barbital buffer and heat in a boiling water bath until completely dissolved.
2. To prepare one gel, pour 14 mL of agarose solution onto the hydrophilic side of a level, well supported 85 mm x 100 mm sheet of Electrophoresis Film for Agarose Gels (Catalog No. E0264). Pour from the center of the sheet toward its edges forming an even layer of agarose 1-1.5 mm thick.
3. Allow the gels to harden for one hour at 4 °C before using or store at 0-5 °C in an appropriate, plastic wrapped container.

Nos agaroses ont les propriétés suivantes :
Teneur en sulfates : sert d'indicateur de pureté, le sulfate étant le principal groupement ionique présent.
Force du gel : équivaut à la force qu'il faut appliquer sur le gel pour le rompre.
Point de gélification : correspond à la température à laquelle une solution aqueuse d'agarose forme un gel en refroidissant. Les solutions d'agarose présentent une hystérésis lorsqu'elles passent de la forme liquide à la forme gélifiée, ce qui signifie que leur point de gélification n'est pas égal à leur température de fusion.
Électro-endosmose (EEO) : définit un mouvement de liquide à travers le gel. Les groupements anioniques d'un gel d'agarose sont fixés à la matrice et ne peuvent pas bouger, mais les contre-ions positifs dissociables peuvent migrer dans la matrice en direction de la cathode, créant ainsi une EEO. Comme le déplacement électrophorétique des biopolymères se fait généralement vers l'anode, l'EEO peut perturber les séparations en raison d'une convection interne.