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Roche

Mélange maître SYBR Green universel FastStart (avec ROX™)

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A propos de cet article

NACRES:
NA.55
UNSPSC Code:
41106300
Service technique
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usage

sufficient for 200 reactions, sufficient for 2000 reactions

feature

dNTPs included: no, hotstart

manufacturer/tradename

Roche

packaging

pkg of 200 x 50 μL reactions (04913850001), pkg of 2000 x 50 μL reactions (04913914001)

technique(s)

RT-qPCR: suitable, qPCR: suitable

input

purified DNA

detection method

probe-based

General description

Le mélange maître FastStart Universal SYBR® Green (avec ROX) est un mélange réactionnel à démarrage à chaud universel prêt à l'emploi qui permet de réaliser des qPCR et des RT-qPCR sur tous les appareils de PCR en temps réel nécessitant une normalisation au colorant ROX.

Le colorant SYBR® Green I est spécifique de l'ADN double brin. Durant chacune des phases de synthèse de l'ADN, le colorant SYBR® Green I, qui est inclus dans le mélange réactionnel, se fixe aux produits de PCR amplifiés. L'amplicon peut être détecté par sa fluorescence.

Les protocoles à démarrage à chaud améliorent significativement la spécificité, la sensibilité et le rendement des PCR. La présence de groupements bloquants thermolabiles sur certains résidus d'acides aminés de la Taq ADN polymérase FastStart inactive l'enzyme modifiée à température ambiante (entre +15 °C et +25 °C). Par conséquent, aucune élongation n'a lieu durant la période où les amorces peuvent se fixer de manière non spécifique. La suppression des groupements bloquants à haute température (étape de préincubation à +95 °C) active la Taq ADN polymérase FastStart.

Application

Le mélange maître FastStart Universal SYBR® Green (avec ROX) peut être utilisé pour l'amplification et la détection de tout ADN ou ADNc cible, y compris ceux riches en GC ou en AT.
Pour d'excellents résultats en qRT-PCR en deux étapes, utiliser ce mélange maître avec le kit de synthèse de premier brin d'ADNc (Transcriptor First Strand cDNA Synthesis Kit) de Roche.
Le mélange maître FastStart Universal SYBR® Green (avec ROX) a été utilisé en qRT-PCR et en qPCR.

Features and Benefits

  • Improve PCR sensitivity and specificity.
Minimize the formation of nonspecific amplification products.

  • Avoid over-estimation of qPCR results.
Eliminate nonspecific amplification products and primer-dimers that increase the amount of bound quantified SYBR Green I.
  • Amplify and detect a broad range of DNA or cDNA targets.
Amplify fragments up to 500 bp long, including those that are GC- or AT-rich.

  • Save time and effort in qPCR preparation.


  • Prevent false positives resulting from carryover contamination.
Use this dUTP-containing mix with Uracil-DNA Glycosylase to eliminate contaminating DNA carried over from previous PCR reactions.

Analysis Note

Contrôle fonctionnel : Chaque lot est soumis à des tests de performance en qPCR à l'aide de trois matrices : une matrice riche en GC, une matrice riche en AT et une matrice longue (environ 440 pb).

Other Notes

FastStart Universal SYBR Green Master (Rox), 2x concentrated master mix that contains FastStart Taq DNA Polymerase, Reaction Buffer, Nucleotides (dATP, dCTP, dGTP, dUTP), SYBR Green I, and a reference dye.
Pour la recherche en sciences de la vie uniquement. Ne pas utiliser dans des procédures de diagnostic.

Legal Information

FastStart is a trademark of Roche
SYBR is a registered trademark of Thermo Fisher Scientific or its subsidiaries


Classe de stockage

12 - Non Combustible Liquids

wgk

WGK 1

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Articles

The purpose of Hot Start PCR is to inhibit the PCR reaction in order to reduce nonspecific amplification, prevent the formation of primer dimers, and increase product yields.

Watch these videos to learn how real time or quantitative PCR (qPCR) works and the benefits of both the SYBR Green-based and probe-based methods of qPCR assay.

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Numéro d'article de commerce international

RéférenceGTIN
491385000104061838338051
491391400104061838338068